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COSMOSIL色譜柱的柱長(zhǎng)及內(nèi)徑的選擇原則是什么?

更新時(shí)間:2023-01-22瀏覽:1519次

  COSMOSIL色譜柱的柱長(zhǎng)及內(nèi)徑的選擇原則是什么?長(zhǎng)度的選擇:柱越長(zhǎng),總柱效越高(n值越大),柱越長(zhǎng),分析時(shí)間也越長(zhǎng)。250—300mm是普遍的柱長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)室一半以上的工作都是采用此規(guī)格柱子,一般用來(lái)分離l0到50個(gè)組份的中等至復(fù)雜混合物;500—600mm,要求較高分辨率的應(yīng)用,—般用來(lái)分離大于50個(gè)組份或包含有難分離物質(zhì)的復(fù)雜樣品程序升溫分析。
  內(nèi)徑:柱效率與柱半徑平方成反比,內(nèi)徑越小柱效越高,但內(nèi)徑越大,柱容量也增加,允許進(jìn)樣量就越多。當(dāng)進(jìn)樣量超過(guò)柱容量時(shí),則因柱內(nèi)每塊理論板內(nèi)不能建立真正的平衡,將會(huì)導(dǎo)致色譜峰畸變,柱分辨率降低,重現(xiàn)性不好。因此對(duì)于復(fù)雜樣品需要準(zhǔn)確分離,必須使用小內(nèi)徑柱子。另一方面若樣品中存在具有很不相同濃度組份化合物,為了增加樣品容量就必須使用內(nèi)徑大的柱子,目前實(shí)驗(yàn)室使用常見(jiàn)的柱子內(nèi)徑一般是4.6mm。
  分析大分子量化合物選擇大孔徑色譜柱;對(duì)于高pH值或者堿性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱,以改善峰形,延長(zhǎng)色譜柱使用壽命等。COSMOSIL色譜柱內(nèi)徑有2.1、3.0、4.6、10mm可供選擇,不銹鋼材質(zhì)不易因?yàn)榭呐鰮p壞柱管。
  正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結(jié)為一句話:使用前要過(guò)濾,使用后要沖洗。具體方法如下:
  1、等度條件:使用緩沖鹽前和使用后需用過(guò)渡流動(dòng)相以1、0ml/min流速?zèng)_洗60min;使用后去除緩沖鹽的另一個(gè)方法是用過(guò)渡流動(dòng)相以0、2ml/min流速?zèng)_洗色譜柱過(guò)夜。
  2、梯度條件:用含有緩沖鹽的流動(dòng)相跑梯度之前,用與初始流動(dòng)相組成相同的過(guò)渡流動(dòng)相以1、0ml/min流速?zèng)_洗60min,再用該過(guò)渡流動(dòng)相以1、0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動(dòng)相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩,以避免梯度過(guò)程中緩沖鹽析出。
  3、緩沖鹽析出的補(bǔ)救方法:
  a、用甲醇/20/80以1、0ml/min流速35攝氏度條件下反向沖洗色譜柱120min
  b、用甲醇/水=20/80以0、2ml/min流速反向沖洗色譜柱過(guò)夜。

 

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